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- 中山杉離體快繁技術(shù)初探
- 發(fā)布日期:[2020/08/20]
中山杉作為一種林業(yè)綠化新種,關(guān)于其引種栽培和生物學(xué)特性的研究報(bào)道較多,但沒有與其組培快繁相關(guān)的資料,因此試驗(yàn)初期選用MS、B5、White、WS、SH等不同基本培養(yǎng)做了預(yù)培養(yǎng)試驗(yàn),根據(jù)預(yù)培養(yǎng)效果選擇了MS、B5、SH3種培養(yǎng)基來進(jìn)行系統(tǒng)對(duì)比試驗(yàn)。此外在激素選擇方面,為了誘導(dǎo)芽的萌發(fā)和分化,先后采用BA、KT、ZT等不同細(xì)胞分裂素進(jìn)行預(yù)試驗(yàn), 把目標(biāo)放在了BA使用水平的探索上,但對(duì)生長(zhǎng)素的使用沒有進(jìn)行詳細(xì)探討,這可能也是試驗(yàn)中芽誘導(dǎo)率不高的原因之一。
中山杉外植體的取材和消毒是試驗(yàn)的難點(diǎn),其枝條及葉柄皺褶很多,不易消毒徹底,即使接種數(shù)周后仍會(huì)有污染產(chǎn)生,而且?guī)缀跞勘憩F(xiàn)為真菌污染,所以在取材時(shí)應(yīng)盡量選擇當(dāng)年新生的嫩枝和新芽,并在消毒前剪去枝條和葉柄,只留下頂芽、側(cè)芽和嫩綠的莖段。在消毒試驗(yàn)中,利用組培實(shí)驗(yàn)室常規(guī)的0.1%HgCl2和2%NaClO消毒效果都不理想,直至把NaClO濃度調(diào)高到10%、處理時(shí)間延長(zhǎng)到30min才勉強(qiáng)解決了外植體消毒的問題,但是使用高濃度消毒液長(zhǎng)時(shí)間消毒對(duì)外植體的損傷問題也隨之顯現(xiàn),外植體在消毒后切口位置明顯受損,接種培養(yǎng)后會(huì)很快褐化或呈白色水漬狀并逐步死亡,因此消毒后的外植體在接入培養(yǎng)基前應(yīng)仔細(xì)切掉受損部位,并在培養(yǎng)基中加入抑制褐變危害的添加物。
綜上所述,該試驗(yàn)在外植體消毒、初代芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基篩選、生根培養(yǎng)條件選擇中分別得到如下結(jié)論:外植體消毒以10%次氯酸鈉溶液浸泡30min效果為 ,消毒后外植體污染率為26.7%,芽存活率為60%;適宜于中山杉芽誘導(dǎo)與增殖的培養(yǎng)基為附加10mg/L6-BA、2g/LAC、30g/L蔗糖、8g/L瓊脂的SH培養(yǎng)基,外植體在該培養(yǎng)基上培養(yǎng)42d,芽誘導(dǎo)率接近50%,增殖系數(shù) 可達(dá)3.6;在生根培養(yǎng)試驗(yàn)中,以附加2.0mg/LNAA、15g/L蔗糖、8g/L瓊脂的1/2MS培養(yǎng)基效果最為理想,中山杉無根小苗在該培養(yǎng)基上培養(yǎng)28d,生根率可達(dá)85.8%,生根指數(shù)為4.9。