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  • 中山杉微體快繁技術(shù)研究結(jié)論與討論
  • 發(fā)布日期:[2020/08/05]
  • 以優(yōu)良無性系中山杉301莖段為外植體,利用MS或1/2MS培養(yǎng)基研究不同濃度和比例的NAA、6-BA、IBA、KT對(duì)中山杉微體快繁的影響,結(jié)果表明:以中山杉301帶腋芽幼嫩枝條為外植體可以實(shí)現(xiàn)微體快繁。MS培養(yǎng)基中NAA含量較高時(shí)可以增加萌芽數(shù)量,6-BA含量過高對(duì)萌芽有抑制作用;誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基配方以MS+NAA0.2mg/L+6-BA0.4mg/L效果 。增殖培養(yǎng)配方以MS+NAA0.3mg/L+6-BA0.4mg/L效果 ,叢芽分化良好,增殖倍數(shù)3.8。相同濃度的IBA和NAA以1/2MS生根誘導(dǎo)數(shù)量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于MS培養(yǎng)基,生根誘導(dǎo)配方以1/2MS+IBA0.3mg/L+NAA0.2mg/L效果 ,較相同激素條件下的MS培養(yǎng)基生根率提高8%。

    在組織培養(yǎng)過程中,影響外植體褐變的因素較多,有研究認(rèn)為取材時(shí)間、取材的位置和植物種類對(duì)褐變有影響,另外,培養(yǎng)基性質(zhì)和外植體不親和也能產(chǎn)生褐變。試驗(yàn)結(jié)果表明,只加NAA或6-BA的處理褐變株數(shù)均高于二者同時(shí)添加的處理,這可能因?yàn)榧に氐臐舛燃捌浔壤龑?duì)褐變的產(chǎn)生有影響;另外,木本植物含有較高的酚類化合物,6-BA促進(jìn)酚類化合物的合成,刺激多酚氧化酶(PPO)活性的提高,切口附近的細(xì)胞收到損傷體內(nèi)酚類物質(zhì)外溢與PPO發(fā)生反應(yīng),也是單一激素處理褐變較高的重要原因之一。NAA濃度在0.1-0.4mg/L范圍內(nèi),中山杉外植體誘導(dǎo)芽數(shù)量和誘導(dǎo)率均有提升,6-BA濃度由0.6mg/L增加到0.9mg/L時(shí),中山杉外植體誘導(dǎo)芽數(shù)量和誘導(dǎo)率大幅下降,說明NAA和6-BA的濃度影響誘導(dǎo)效果。植物快速繁殖過程中常借助繼代培養(yǎng)的方式來獲得叢芽并進(jìn)行增殖培養(yǎng)。方利娟在6-BA與NAA對(duì)雜交松組培增殖效果試驗(yàn)中得出,6-BA對(duì)雜交松不定芽的增殖起決定作用,而NAA有利于提高增殖效率和增殖倍數(shù)。本試驗(yàn)條件下,0.3mg/LNAA和0.4mg/L6-BA的T9處理,叢芽數(shù)、增殖倍數(shù)遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于其他處理,叢芽生長(zhǎng)狀況 ,說明二者組合對(duì)中山杉叢芽的繼代增殖起關(guān)鍵作用。

    外植體經(jīng)組織培養(yǎng)會(huì)產(chǎn)生大量的嫩芽、新梢,而誘導(dǎo)芽生根關(guān)系到能否大量生產(chǎn)和實(shí)際應(yīng)用,所以誘導(dǎo)生根是植物微體繁殖的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。林景泉研究認(rèn)為,最適于速生優(yōu)良杉木生根的培養(yǎng)基是1/2MS+蔗糖30/L+IBA1.2mg/L+NAA0.4mg/L。本試驗(yàn)結(jié)果表明,1/2MS培養(yǎng)基+0.3mg/LIBA+0.2mg/LNAA的配方較其他處理有利于中山杉組培苗生根和根系健壯,與前者在核桃上的研究結(jié)果存在異同,這是因?yàn)樵嚬苊绲纳艿桨ㄖ参锲贩N、基因型、基本培養(yǎng)基類型和植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑等在內(nèi)的多重因素的綜合作用。


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