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- 叢枝菌根真菌對大葉女貞耐鹽性的材料和方法
- 發(fā)布日期:[2020/06/28]
1.1試驗材料
試驗于2020年4 月在承德市林業(yè)局苗圃進行。供試植物為大葉女貞,購自世博林業(yè);供試叢枝菌根真菌為摩西球囊霉菌( Glomus mosseae) ,由中國農(nóng)業(yè)科學院 植物保護研究所提供;供試分析純 NaCl 購自北京市通廣精細 化工有限公司。將大葉女貞幼苗栽植于45 cm × 40 cm( 長 × 寬) 花盆中,每盆定植1 株,栽培基質(zhì)為改良土壤基質(zhì)。緩苗期為1 個月,其間進行正常的水分、養(yǎng)分管理及病蟲害防治。 2017 年5 月從定植苗中選取長勢、大小一致的大葉女貞苗木進行鹽脅迫試驗。
1.2 試驗方法
1.2.1 試驗設計 試驗共設叢枝菌根真菌和鹽脅迫2 個因 素,叢枝菌根真菌設 2 個水平,分別在定植前接種20 g 叢枝 菌根真菌和20 g 經(jīng)高溫滅菌的叢枝菌根真菌( CK) ; 鹽脅迫 試驗共設6 個水平,分別將 NaCl 濃度設置為 0、3、6、9、12、15 mg/g。試驗設叢枝菌根真菌( 處理與對照) × NaCl 濃度( 6 水 平) 共12 個處理,每個處理重復10 盆,共120 盆,隨機區(qū)組設 計。為避免鹽沖擊效應, NaCl 濃度每天按 3 mg/g 梯度遞增, 直至達到各處理預定濃度,然后每隔3 d 按預定鹽濃度澆灌1 次,澆灌量為300 mL。
1.2.2 項目測定及方法 鹽脅迫處理 60 d 后,對大葉女貞 進行各數(shù)據(jù)指標測定。根系菌根侵染率測定采用 Phillips 等 的方法,菌根侵染率 = 侵染菌根段數(shù)/檢測菌根段數(shù) × 100%;生物量主要測定大葉女貞的株高、莖粗、地徑和總干質(zhì) 量;采用相對電導法( relative conductance,簡稱 RC) 測定葉片 細胞膜透性; MDA 含量測定采用硫代巴比妥酸比色法; 分別 采用抑制硝基四氮唑藍( nitrotetrazolium blue chloride,簡稱 NBT) 光還原比色法、愈創(chuàng)木酚法和紫外分光光度法對 SOD、 POD 和 CAT 活性進行測定; Pro 含量測定采用磺基水楊酸提 取法和可溶性糖( SS) 含量測定采用蒽酮比色法; 可溶性蛋白 ( SP) 含量采用考馬斯亮藍 G-250 法進行測定。
1.2.3 數(shù)據(jù)分析 采用 Excel 2010 軟件進行試驗數(shù)據(jù)整理、 計算及作圖,差異顯著性分析采用 SPSS 18.0 進行。
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